提RNA（我有大用之我说药代没有整好酶标仪版

【超净台内操作，可全程使用室温离心机】

1、2ml EP管收集六孔板内与真菌共培0、2、24h后的巨噬细胞上清液（含有一些炎症因子，可以wb验证），放置冰上

2、贴壁加PBS洗净六孔板

【可消化可不消化】

3、六孔板贴壁加500ul LB液，吹打至无细胞团，或去涡旋，静置1min

4、将细胞吹打下来，收集于2ml EP管，小枪吸净

5、离心柱内贴壁加裂解液，4度离心机13500g 30s，留沉淀弃液

【以下操作可在台外】

6、离心柱外面的EP管倒干净后，安装好离心柱，加入500ul WB液（检查是否加了无水乙醇），4度离心机13500g 30s，留沉淀弃液，此步骤重复1次

7、离心柱外面的EP管倒干净后，4度离心机13500g 2min空转，沥去多余无水乙醇

8、离心柱外的EP换新的无酶EP，安装好离心柱，加50ul 无酶水，室温离心机13500g 1min，洗脱收集RNA，此步骤可重复洗脱，以增加RNA浓度

9、酶标仪测OD（如果blank没调好，会出现峰值正确但是负值的浓度），余-80度冰箱保存