Annexin V细胞凋亡检测试剂盒常见问题
- Abbkine Annexin V细胞凋亡检测试剂盒可以检测人类以外动物的细胞凋亡吗？
答：当然。因为试剂盒原理是Annexin V与磷脂酰丝氨酸（PS）亲和，而PS在不同物种之间没有差异。
- 胰酶对贴壁细胞的影响？
答：胰酶对细胞膜有一定的损伤，但用低浓度胰酶消化， 轻柔吹打贴壁细胞 2～ 3 次， 离心机 4℃， 300g， 5min 离心，处理得当的话， 胰酶造成的损伤可以控制在 5%以内， 有对照组的情况下对实验结果不会造成明显影响。
- 为什么只能用不含 EDTA 的胰酶消化贴壁细胞？
答：Annexin V 是 Ca 依赖性蛋白， 所以不能加入 EDTA， 防止 EDTA 螯合了 Ca 离子从而影响 Annexin V， 进而影响结果。
细胞凋亡（apoptosis）是一种基本生物学现象，指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。在正常活细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）位于细胞膜的内侧，而在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。膜联蛋白V(Annexin V) 是一种分子量为35~36KDa的钙离子依赖型磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。通过AbFluorTM 488标记Annexin V即可简单快速地直接检测出细胞早期凋亡情况（绿色荧光）。
碘化丙啶（propidine iodide，PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，而早期凋亡细胞的细胞膜是完好的，对PI有拒染性。但在凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能透过细胞膜而使细胞核染上。
使用AbFluo™488和碘化丙啶（PI）对细胞进行染色可以区分完整细胞，早期凋亡和晚期凋亡或坏死细胞。有关详细信息，请参阅下面的列表。
产品名称货号激发光与发射光Annexin V-AbFluor™ 488 Apoptosis Detection kitKTA0002Ex/Em = 491/517 nm
* PI：Ex/Em = 535/617 nm (DNA) Abbkine使用卓越的AbFluor™ 染料，针对Annexin V研发了多种偶联产物。AbFluor™染料与其它荧光标记染料相比，如FITC，TRITC，Cy®染料，AlexaFluor®和Dylight®标记染料，具有相同或更好的标记性能和荧光表现（荧光亮度，耐光性），特别适用于体内成像和流式细胞术。
以Annexin V-AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒为例：
使用喜树碱（camptothecin）诱导Hela细胞凋亡（24h），使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色。图中展示的是晚期凋亡/坏死细胞。（绿色为细胞膜，红色为细胞核）
使用喜树碱（camptothecin）诱导Hela细胞凋亡（24h）。 使用Annexin V- AbFluor™ 488 细胞凋亡检测试剂盒进行染色，可以区分早期凋亡细胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 阳性), 晚期凋亡或坏死细胞 (Annexin V- AbFluor™ 488 与PI 均为阳性), 和活细胞 (未染色).
