法医学 第二周 Chemical Analysis in Forensic Science 第九课 GC & HPLC
气相色谱法Gas Chomatography简称GC,在很多方面都要比别薄层色谱法优越。更高的分辨率,更高的灵敏度。显然,气相色谱法的流动相是被称为载气的气体而不是液体。其次,它并不是用薄板,换成了色谱柱来装载固定相。尽管叫做柱,但实际上不是柱,这只是个历史遗留名字。
气相色谱法的固定相包裹于一根长长的金属毛细管中。为了节省空间,金属管被绕成线圈放入仪器内部。
流动相左进右出,最后进入电脑,被记录信号并分析。在薄层色谱法TLC中,我们测量的是不同组分的移动距离,在气相色谱法中,各组分通过的距离是一样的,我们测量的是他们通过柱子的时间。此时不再用保留因子来计算,而是使用保留时间retention time。最后得到的是下图
一个类似柱状图的色谱图。如果我们已知某一物质A通过色柱的时间a,现在未知物质通过色柱的时间也是a那么基本可以确定未知物质便是A,只是这个结果和TLC类似,并不是很准确。
GC和TLC的另一种技术差别是色谱图在短时间内会出现一个巨大的峰值,不过这是可以忽略的,因为这是溶剂引起的。我们要测试样本,让他通过色柱,就必须将它溶解,溶剂本身也会被检测到,但是溶剂走的特别快,所以在一分钟左右之后色谱图里面就会出现一个巨大的峰值。
GC比TLC的另一个优势在于,GC可以精确的定量测量。色谱图中的某个波峰下的面积大小和样品中的量成比例关系。由此不仅可以将各组分分离,还可以测量各组分之间的相对含量。
HPLC,高效液相色谱法High Performance Liquid Chromatography,又称高压液相色谱法,在法庭科学中占有举重轻重的位置。它使用钢柱作为固定相载体,因为分离过程中会用到高压。为毛要用到高压,因为钢柱中的固定相是紧密填塞的极细微材料,为了使得流动相达到工作速度,就需要巨大的泵来加压使得液体流动。HPLC和GC几乎一样,都是测量样本进入固定相之后的停留在里面的时间。得出的色谱也和GC非常相似。
GC和HPLC两种方法都很高效,可以应用于各种化合物上,灵敏度高,只需一点样本就可以分析,它们都是非破坏性的检测,测量之后都可以回收样本,只是很少有人这么做。它们都可以定量分析,了解各组分的比例,还有着高分辨率。
GC的设备要求简单一些,所以也就便宜一些,分析起来还更高效更快速一些。HPLC的优点在于可以分析非挥发性和热不稳定性样品。
气相色谱法的固定相包裹于一根长长的金属毛细管中。为了节省空间,金属管被绕成线圈放入仪器内部。
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流动相左进右出,最后进入电脑,被记录信号并分析。在薄层色谱法TLC中,我们测量的是不同组分的移动距离,在气相色谱法中,各组分通过的距离是一样的,我们测量的是他们通过柱子的时间。此时不再用保留因子来计算,而是使用保留时间retention time。最后得到的是下图
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一个类似柱状图的色谱图。如果我们已知某一物质A通过色柱的时间a,现在未知物质通过色柱的时间也是a那么基本可以确定未知物质便是A,只是这个结果和TLC类似,并不是很准确。
GC和TLC的另一种技术差别是色谱图在短时间内会出现一个巨大的峰值,不过这是可以忽略的,因为这是溶剂引起的。我们要测试样本,让他通过色柱,就必须将它溶解,溶剂本身也会被检测到,但是溶剂走的特别快,所以在一分钟左右之后色谱图里面就会出现一个巨大的峰值。
GC比TLC的另一个优势在于,GC可以精确的定量测量。色谱图中的某个波峰下的面积大小和样品中的量成比例关系。由此不仅可以将各组分分离,还可以测量各组分之间的相对含量。
HPLC,高效液相色谱法High Performance Liquid Chromatography,又称高压液相色谱法,在法庭科学中占有举重轻重的位置。它使用钢柱作为固定相载体,因为分离过程中会用到高压。为毛要用到高压,因为钢柱中的固定相是紧密填塞的极细微材料,为了使得流动相达到工作速度,就需要巨大的泵来加压使得液体流动。HPLC和GC几乎一样,都是测量样本进入固定相之后的停留在里面的时间。得出的色谱也和GC非常相似。
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GC和HPLC两种方法都很高效,可以应用于各种化合物上,灵敏度高,只需一点样本就可以分析,它们都是非破坏性的检测,测量之后都可以回收样本,只是很少有人这么做。它们都可以定量分析,了解各组分的比例,还有着高分辨率。
GC的设备要求简单一些,所以也就便宜一些,分析起来还更高效更快速一些。HPLC的优点在于可以分析非挥发性和热不稳定性样品。
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