失败大赏｜PCR没有条带我要疯了

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  江湖惯骗 2021-06-28 22:50:45

  我之前遇到过这个情况！！！不知道楼主PCR体系是多大的，我之前10微升体系一直跑不出来，扩大到20微升就跑出来了。

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  彻底疯狂！ 楼主 2021-06-28 23:04:22

  我之前遇到过这个情况！！！不知道楼主PCR体系是多大的，我之前10微升体系一直跑不出来，扩大到2 我之前遇到过这个情况！！！不知道楼主PCR体系是多大的，我之前10微升体系一直跑不出来，扩大到20微升就跑出来了。 ... 江湖惯骗

  我是50微的😶第一次不知道为什么没跑出来，第二次之前的模板没有了，换了模板又跑了一次就跑出来了……疑惑，难道是模板有问题……？

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  卷心菜 2021-06-29 00:54:22

  问问同组师兄师姐有没有出现过这种情况？

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  卷心菜 2021-06-29 00:55:11

  我是50微的😶第一次不知道为什么没跑出来，第二次之前的模板没有了，换了模板又跑了一次就跑出 我是50微的😶第一次不知道为什么没跑出来，第二次之前的模板没有了，换了模板又跑了一次就跑出来了……疑惑，难道是模板有问题……？ ... 彻底疯狂！

  是不是可能模板不稳定，降解啥的？

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  ShuangL 2021-06-29 08:24:42

  我是50微的😶第一次不知道为什么没跑出来，第二次之前的模板没有了，换了模板又跑了一次就跑出 我是50微的😶第一次不知道为什么没跑出来，第二次之前的模板没有了，换了模板又跑了一次就跑出来了……疑惑，难道是模板有问题……？ ... 彻底疯狂！

  要不要多个模板混在一起试一下？

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  彻底疯狂！ 楼主 2021-06-29 09:49:55

  要不要多个模板混在一起试一下？ 要不要多个模板混在一起试一下？ ShuangL

  第二次是分别跑了4个模板，结果4个都出了🤔困惑

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  彻底疯狂！ 楼主 2021-06-29 09:51:44

  问问同组师兄师姐有没有出现过这种情况？ 问问同组师兄师姐有没有出现过这种情况？ 卷心菜

  🌚我之前也遇到过，也是跑了第二次就好了……就不知道为什么

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  卷心菜 2021-06-29 09:53:19

  🌚我之前也遇到过，也是跑了第二次就好了……就不知道为什么 🌚我之前也遇到过，也是跑了第二次就好了……就不知道为什么 彻底疯狂！

  我都是第一次跑得了，以后都不行

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  谁都认不出我 2021-06-29 11:06:34

  你可以先拿taq酶热启动摸索一下tm，touch down啥的也可以试试，然后换高保真，个人觉得taq好p一点，虽然那个taq酶说不需要热启动，但是我试了一下热启动就出来了

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  miaomiao 2021-06-30 11:37:07

  我也是用cDNA做PCR，P了十二次，才搞出来

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  小猎猎 2022-03-31 10:48:25

  我也是用cDNA做PCR，P了十二次，才搞出来 我也是用cDNA做PCR，P了十二次，才搞出来 miaomiao

  姐妹，你是咋P出来的啊，能留个联系方式吗，俺也郑州的，谢谢姐妹！

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  Muggle 2022-07-20 20:57:59

  我也是用cDNA做PCR，P了十二次，才搞出来 我也是用cDNA做PCR，P了十二次，才搞出来 miaomiao

  大佬，能说一下经验吗？现在用cDNA一直P不出来，不知道哪一步出问题了

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  miaomiao 2022-07-21 06:07:06

  大佬，能说一下经验吗？现在用cDNA一直P不出来，不知道哪一步出问题了 大佬，能说一下经验吗？现在用cDNA一直P不出来，不知道哪一步出问题了 Muggle

  先调退火温度，再换体系和酶，还有PCR退火是梯度还是定时温度很重要

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  顾矜 2022-07-21 07:40:02

  曾经我p了十几次出不来，然后找隔壁师兄讨了一点贼贵的酶一下就出了......有时候可能是钱没花到位的问题🚬

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