细胞复苏后总是碎掉

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  阿凛子君 (是个人类。) 2022-04-21 20:36:13

  想问问你们是怎么冻存的呀

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  绿色的酱 2022-04-21 20:44:23

  这是死细胞，没关系的，换个液继续培养

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  流月月 楼主 2022-04-21 21:05:15

  这是死细胞，没关系的，换个液继续培养 这是死细胞，没关系的，换个液继续培养 绿色的酱

  培养瓶里面都是这样的，几乎没有贴壁的

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  流月月 楼主 2022-04-21 21:06:37

  想问问你们是怎么冻存的呀 想问问你们是怎么冻存的呀 阿凛子君

  冻存液是培养基：血清：DMSO6：3：1 然后4℃40min，-20℃2H然后放到-80

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  阿凛子君 (是个人类。) 2022-04-21 21:14:13

  冻存液是培养基：血清：DMSO6：3：1 然后4℃40min，-20℃2H然后放到-80 冻存液是培养基：血清：DMSO6：3：1 然后4℃40min，-20℃2H然后放到-80 流月月

  我们一般是血清：DMSO=9:1，不加培养基，冻存的话我们用的是冻存盒直接放负八十（里边有异丙醇，可以在负八十冰箱缓慢降温），第二天转液氮罐。不过我觉得好像都不影响，我听说有些实验室的冻存方案和你们差不多。不过负八十保存的话放不了太久，最长只能储存一个月。

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  流月月 楼主 2022-04-21 21:15:12

  我们一般是血清：DMSO=9:1，不加培养基，冻存的话我们用的是冻存盒直接放负八十（里边有异丙醇， 我们一般是血清：DMSO=9:1，不加培养基，冻存的话我们用的是冻存盒直接放负八十（里边有异丙醇，可以在负八十冰箱缓慢降温），第二天转液氮罐。不过我觉得好像都不影响，我听说有些实验室的冻存方案和你们差不多。不过负八十保存的话放不了太久，最长只能储存一个月。 ... 阿凛子君

  之前复苏成功过，之后就一直是这样

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  阿凛子君 (是个人类。) 2022-04-21 21:16:30

  之前复苏成功过，之后就一直是这样 之前复苏成功过，之后就一直是这样 流月月

  会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。

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  阿凛子君 (是个人类。) 2022-04-21 21:16:46

  会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 阿凛子君

  复苏不起来（打错字了）

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  流月月 楼主 2022-04-21 21:17:15

  会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 阿凛子君

  之前可以啊，同一批

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  阿凛子君 (是个人类。) 2022-04-21 21:19:24

  之前可以啊，同一批 之前可以啊，同一批 流月月

  呜呜，我也不懂了，帮你dd看看有没有其他人帮忙解释一下

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  豆友178448452 2022-04-21 23:55:19

  [内容不可见]

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  豆友178448452 2022-04-21 23:56:16

  会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 会不会就是储存时间的问题呀，负八十储存超过一个月细胞就储存不起来了。 阿凛子君

  [内容不可见]

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  奏鸣曲 2022-04-22 06:33:22

  我们之前也是FBS:DMSO=9:1，复苏后活细胞30%，要调好几天状态。后面用无血清冻存液亲测效果很好，80%都能存活～

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  毛豆豆 2022-04-22 11:39:14

  一般珍贵一点的细胞会 血清：DMSO 9:1配冻存液，一般细胞冻存是培养基：血清：DMSO 7:2:1配冻存液。我们用程序降温盒放-80度冰箱，第二天需要及时转移到液氮罐里面保存，-80冰箱冻存细胞温度不稳定就是容易复苏不回来，或者在程序降温中有其他人移动了你的细胞，没有让细胞程序降温，细胞冻存复苏一定要慢冻快融。

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  豆友id3YbUdl5o 2022-04-23 15:38:15

  是不气冻存的时候的问题

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  是小丸子鸭 2022-04-24 13:03:48

  有没有细胞一拿出来立即就放水浴锅融化？

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  流月月 楼主 2022-04-24 13:24:15

  有没有细胞一拿出来立即就放水浴锅融化？ 有没有细胞一拿出来立即就放水浴锅融化？ 是小丸子鸭

  有的

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